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更新时间:2025-04-09
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
产品名称:小鼠真皮成纤维细胞
组织来源:皮肤组织
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3-5代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
小鼠真皮成纤维分离自真皮组织;真皮,位于表皮深层,向下与皮下组织相连,真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起,埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维,使皮肤既有弹性,又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的真皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。真皮成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括:构造和维持组织的正常形态,合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠真皮成纤维采用先消化、后-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠真皮成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的产品:
调节活化蛋白 英文名称: Human Raes 规格: 英文缩写: RAES
活性氧 英文名称: Human Reactive Oxygen Species 规格: 英文缩写: ROS
胰腺再生蛋白1a 英文名称: Human Regenerating Islet Derived Protein 1a 规格: 英文缩写: REG1a
再生胰岛衍生蛋白 英文名称: Human Regenerating Islet Derived Protein 规格: 英文缩写: REG
小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA 星空体育莱切 96T/48T
Rat cardiac oponin I (cTn- I) ELISA Kit 大鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)星空体育莱切
Human6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit 人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)星空体育莱切 96T/48T 进口分装
HumanC-Peptide星空体育莱切人C肽(C-Peptide)星空体育莱切规格:96T/48T
组织CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定性星空体育莱切20次
Humanproteindisulfideisomerase,PDIELISAKit人蛋白质二硫键异构酶(PDI)星空体育莱切规格:96T/48T
FITC标记人CD73单克隆抗体
非霍奇金淋巴瘤蛋白抗体
CCL1重组人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 (Fc 标签) Protein
克拉拉细胞蛋白16(CC16)重组蛋白 Recombinant Clara Cell Protein 16 (CC16)
MSRB3重组人 MSRB3 蛋白 Protein
IFNAR2 Protein Human 重组人 IFNAR2 / IFNABR 蛋白 (Fc 标签)
HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
克拉拉细胞蛋白16(CC16)重组蛋白 Recombinant Clara Cell Protein 16 (CC16)
IFNAR2 Protein Human 重组人 IFNAR2 / IFNABR 蛋白 (Fc 标签)
CCL1重组人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 (Fc 标签) Protein
HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
MSRB3重组人 MSRB3 蛋白 Protein
小鼠真皮成纤维细胞大鼠促甲状腺素受体(TSHR)星空体育莱切 ,英文名: TSHR ELISA Kit
Mouse 17- Ketosteroid (17-KS) ELISA Kit 小鼠17-酮类固醇(17-KS)星空体育莱切
ELISA 小鼠骨唾液酸蛋白(mouse BSP) 进口分装
CLIAKitforLHRH(HumanLeinizingHormone-ReleasingHormone)ELISAKit人黄体生成素释放激素
通用型HCV亚型(HEPATITISVIRUSC)病毒定量PCR扩增星空体育莱切(1a、1b、2a、2b、3a、3b)20次
ELISAKitPNA花生凝集素
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作