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更新时间:2025-04-09
人口腔角质形成细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
口腔 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X8298 |
细胞简介:
人口腔角质形成分离自口腔组织;口腔黏膜在组织学形态上分为上皮、固有层和黏膜下层;口腔黏膜上皮细胞按是否参与角化被分为角质形成细胞与非角质形成细胞,主要由角质形成细胞构成;前者组成复层鳞状上皮,后者游离分布于上皮层内。根据在口腔内部位的不同,复层鳞状上皮可分为角化、不全角化或无角化型等几类。以角化型上皮为例,由上皮的深面至浅面可分为基层、棘层、粒层及角化层等四层。
方法简介:
实验室分离的人口腔角质形成采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的人口腔角质形成经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基:基础培养基,含FBS、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
传代特性:2-3代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
人口腔角质形成体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
乙醇酸氧化酶测试盒 可见分光光度法 50管/48样
锰过氧化物酶(MnP)测试盒 可见分光光度法 50管/24样
双缩脲法蛋白含量测试盒 可见分光光度法 50管/48样
双缩脲法蛋白含量测试盒 可见分光光度法 100管/96样
鸭子β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA 星空体育莱切
Human ai thrombin receptor (A) ELISA Kit 人抗受体(A)星空体育莱切
HumanGlycatedhemoglobinA1c,GHbA1cELISAKit 人糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)星空体育莱切 进口分装
CLIAKitforACV-AELISAKit大鼠活化素A
血液组织蛋白酶L(CATHEPSINL)活性比色法定量星空体育莱切20次
MouseProinsulin,PIELISAKit小鼠胰岛素原(PI)星空体育莱切
JmjC结构域组蛋白去甲基化酶H3-K36抗体
视网膜母细胞瘤结合蛋白8抗体
ACVR2B重组食蟹猴 ACVR2B / ACTRIIB 蛋白 (His 标签) Protein
Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha 0.5mgInsulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha) 胰岛素受体-α(抗原)
PDE2A重组人 PDE2A / CGS-PDE 蛋白 (aa 215-900, His 标签) Protein
CALM2 Protein Human 重组人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 (His 标签)
NGFR Protein Mouse 重组小鼠 NGFR / P75 蛋白
Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha 0.5mgInsulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha) 胰岛素受体-α(抗原)
CALM2 Protein Human 重组人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 (His 标签)
ACVR2B重组食蟹猴 ACVR2B / ACTRIIB 蛋白 (His 标签) Protein
NGFR Protein Mouse 重组小鼠 NGFR / P75 蛋白
PDE2A重组人 PDE2A / CGS-PDE 蛋白 (aa 215-900, His 标签) Protein
人口腔角质形成细胞大鼠白介素10(IL-10)星空体育莱切 ,英文名: IL-10 ELISA Kit
Rabbit collagenase I (Collagenase I) ELISA Kit 兔子胶原酶I(Collagenase I)星空体育莱切
ELISA 小鼠促黄体生成激素(mouse LH) 进口分装
CLIAKitforIL-27ELISAKit大鼠白介素27
通用型精(arginine)含量化学比色法定量星空体育莱切20次
ELISAKitPDGF大鼠血小板衍生生长因子
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行