小鼠关节囊成纤维细胞

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更新时间：2025-04-09

小鼠关节囊成纤维细胞

商品属性：

细胞简介：

小鼠关节囊成纤维分离自关节囊组织；关节囊（articular capsule）是由结缔组织构成的膜囊，附着于关节的周围，密封关节腔。关节囊的壁共有两层：外层为纤维层；内层为滑膜层。纤维层实际上是一个连结骨的骨膜向另一骨骨膜的移行。纤维层厚而坚韧，由致密结缔组织构成，含有丰富的血管和神经。其浅层纤维多呈纵行排列；深层纤维主要为环行纤维。纤维层的厚薄，各个关节不相同，即是在同一关节中，各部也不一致一般在运动范围小的或是负重较大的关节中，都较厚而紧张，相反，于运动灵活的关节，则较薄而松弛。有的关节囊的部分纤维囊缺如，仅一层滑膜层；有的部分明显增厚，形成韧带。滑膜层薄而柔润，是由疏松结缔组织构成，衬在纤维层内面，周缘附着在关节软骨的边缘。它朝向关节腔的内面光而发亮，此面上盖有一层内皮细胞。滑膜向关节腔分泌滑液，滑液是稍粘稠而透明的液体，可减少关节中相连骨的摩擦，是一种滑润剂。滑膜表面可形成绒毛或皱襞突入关节腔内。有时滑膜层可以穿过纤维层呈囊状向外膨出，形成滑膜囊，常位于肌腱与骨面之间。有时滑膜层突出不明显，仅呈深窝状，称为囊状隐窝。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

方法简介：

实验室分离的小鼠关节囊成纤维采用混合酶消化结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的小鼠关节囊成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基：基础培养基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传1-2代左右

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

小鼠关节囊成纤维体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态：

细胞传代及冻存：

原代细胞的培养方法一般有以下4种：

　　① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

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CAMK1G Protein Human 重组人 CAMK1G / CLICK III / CaMKIgamma 蛋白 (His & GST 标签)

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原代细胞的培养条件：

　　一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养

　　1、细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性；

　　2、细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L；

　　3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养；

　　4、 胎牛血清浓度为10%-80%

　　5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养；

　　6、在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂浮；

　　7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状，应将原代细胞换液；

　　8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时，应将细胞悬液经低速离心后换液。

　　二、悬浮细胞培养

　　1、原代培养时要尽量去除红细胞；

　　2、短期培养，可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行；

　　3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内，进行分瓶试验；

　　4、长期培养时，淋巴细胞中要加入生长因子，白血病细胞中要加入少量的原患者血清，以利细胞生长；

　　5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次；

　　6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行